효율적인 1M 칼륨 포스포트 버퍼 준비 가이드

실험실에서 연구자들은 종종 버퍼 용액의 지루한 준비와 싸웁니다.특유의 완충 능력과 뛰어난 수분 용해성으로 유명합니다., 분자생물학과 식물학을 포함한 다양한 과학 분야에 필수적입니다. 그러나,특정 금속 이온 (칼슘과 마그네슘 등) 과 반응하고 에탄올 용액에 침착하는 경향이 있어 실험에 상당한 과제가 있습니다.이 문서에서는 pH 6에서 1M 칼륨 인산 버퍼를 준비하기위한 자세한 프로토콜을 제공합니다.5연구자들에게 그들의 실험 필요에 대한 신뢰할 수 있는 솔루션을 제공합니다.

고모리 버퍼로도 알려진 칼륨 포스포트 버퍼는 단기적 칼륨 포스포트 (KH₂직무장₄) 와 디바시 폼페이트 칼륨 (K₂HPO₄이 버퍼 시스템은 여러 가지 장점을 제공합니다: 우수한 버퍼 용량, 높은 수 용도 및 비용 효율성.연구자들은 이 버퍼가 칼슘과 마그네슘과 같은 금속 이온과 반응한다는 것을 알아야 합니다., 이는 효소의 활동을 억제하고 에탄올 용액에서 침착물을 형성 할 수 있습니다.

이러한 한계에도 불구하고, 칼륨 인산 펌퍼는 과학 연구의 기본 요소로 남아 있습니다. 그것은 생화학적 반응, 세포 배양 시스템,단백질 정화 프로토콜펌퍼의 pH는 두 포스파트 구성 요소의 비율을 수정함으로써 정확하게 조정 할 수 있으며, 다양한 실험 요구 사항에 적응 할 수 있습니다.

다음 프로토콜은 pH 6에서 1M 칼륨 인산 버퍼의 1 리터의 준비에 대해 자세히 설명합니다.5:

준비 프로토콜:

• 초기 준비:적당한 용기에 800 ml의 증류수를 첨가합니다.
• KH의 해체₂직무장₄:95g의 단기 칼륨 인산염을 물에 넣고 완전히 녹아들기 전까지 계속 섞는다.
• K의 해체₂HPO₄:52.5g의 디바시크 칼륨 포스파이트를 계속 섞어 용액에 넣는다.
• pH 조절:평준화 된 pH 미터를 사용하여 희석 된 염화수소 또는 칼륨 하이드록시드 용액으로 pH 6.5로 조심스럽게 조정합니다.추가 사이에 철저한 혼합을 통해 점진적으로 조정 수행.
• 최종 부피 조정:용액을 한 리터의 최종 용량으로 증류된 물로 넣고 잘 섞는다.
• 살균:용액을 0.22μm 막 필터로 필터링하여 살균합니다. 냉동-열화 주기를 최소화하기 위해 살균성 버퍼를 알리쿼트합니다.
• 보관:필터링 된 버퍼를 실내 온도에서 보관하십시오.

• 반응기 품질:분석등급 또는 더 높은 순수성 반응제를 사용하여 불순물이 실험에 방해를 가하지 않도록 한다.
• 물 품질:고품질의 증류 물 또는 이온화 물 을 사용 하여 오염물질 이 들어가지 않도록 한다.
• pH 미터 캘리브레이션:항상 사용 전에 표준 버퍼로 pH 미터를 캘리브레이트하십시오.
• 혼합:모든 준비 단계에서 철저하게 섞어야 합니다.
• 무독성 기술:필터링 도중 엄격한 비생태 조건을 유지합니다.
• 보관 조건:시원하고 어두운 곳에 보관하여 버퍼의 무결성을 유지합니다.

연구자들은 후속 희석을 위해 농축 된 주식 용액 (5M 또는 10M) 을 준비함으로써 실험 효율성을 향상시킬 수 있습니다.펌퍼의 pH 범위는 포스파트 구성 요소 비율을 변경하여 수정 할 수 있습니다., 이온 강도 조정은 나트륨 엽수화물 보충을 통해 달성 할 수 있습니다. 금속 민감한 프로세스를 포함하는 실험에서 EDTA를 켈레이팅 물질로 추가하는 것을 고려하십시오.pH 에 민감 한 응용 프로그램 에서 온도 조절 은 필수적 이다.

칼륨 포스파트 버퍼는 많은 응용 프로그램을 효과적으로 제공하지만, 다른 버퍼 시스템은 특정 상황에서 바람직할 수 있습니다.트리스 버퍼는 포스파트 간섭이 문제가 될 때 가치가 있습니다., HEPES 버퍼는 세포 독성이 낮기 때문에 세포 배양 응용에 장점을 제공합니다.버퍼 선택은 실험 요구 사항과 잠재적 간섭 고려 사항에 의해 안내되어야 합니다..

1M의 칼륨 포스파트 버퍼를 pH 6.5에서 만드는 것은 기본적인 실험실 기술입니다.버퍼의 특성과 제한에 대한 이해와 결합, 연구자들이 자신감과 정확성으로 실험을 수행할 수 있게 해줍니다.