1 এম পটাসিয়াম ফসফেট বাফার প্রিপের জন্য গাইড

গবেষণাগারে, গবেষকরা প্রায়শই বাফার সলিউশন প্রস্তুত করার সাথে লড়াই করে। পটাসিয়াম ফসফেট বাফার,তার ব্যতিক্রমী বাফারিং ক্ষমতা এবং চমৎকার জল দ্রবণীয়তার জন্য বিখ্যাত, বিভিন্ন বৈজ্ঞানিক শাখায় মৌলিক জীববিজ্ঞান এবং উদ্ভিদবিদ্যা সহ অপরিহার্য হয়ে উঠেছে।এর প্রবণতা নির্দিষ্ট ধাতব আয়ন (যেমন ক্যালসিয়াম এবং ম্যাগনেসিয়াম) এর সাথে প্রতিক্রিয়া এবং ইথানল দ্রবণে precipitate উল্লেখযোগ্য পরীক্ষামূলক চ্যালেঞ্জ উপস্থাপন করেএই নিবন্ধটি পিএইচ 6 এ 1 এম পটাসিয়াম ফসফেট বাফার প্রস্তুত করার জন্য একটি বিস্তারিত প্রোটোকল প্রদান করে।5, গবেষকদের তাদের পরীক্ষামূলক চাহিদার জন্য একটি নির্ভরযোগ্য সমাধান প্রদান করে।

পটাসিয়াম ফসফেট বাফার, যা গোমোরি বাফার নামেও পরিচিত, এটি একক ভিত্তিক পটাসিয়াম ফসফেট (কেএইচ) এর মিশ্রণ₂পিও₄) এবং ডাইবেসিক পটাসিয়াম ফসফেট (কে₂এইচপিও₄) এই বাফার সিস্টেমটি বেশ কয়েকটি সুবিধা প্রদান করেঃ উচ্চতর বাফারিং ক্ষমতা, উচ্চ জল দ্রবণীয়তা এবং খরচ কার্যকারিতা।গবেষকদের সচেতন হওয়া উচিত যে এই বাফার ক্যালসিয়াম এবং ম্যাগনেসিয়াম মত ধাতু আয়ন সঙ্গে প্রতিক্রিয়া, যা এনজাইম কার্যকলাপকে বাধা দিতে পারে এবং ইথানল সমাধানগুলিতে precipitates গঠন করে।

এই সীমাবদ্ধতা সত্ত্বেও, পটাসিয়াম ফসফেট বাফারটি বৈজ্ঞানিক গবেষণার একটি প্রধান উপাদান হিসাবে রয়ে গেছে। এটি বায়োকেমিক্যাল প্রতিক্রিয়া, কোষ সংস্কৃতি সিস্টেম,এবং প্রোটিন বিশুদ্ধকরণ প্রোটোকলএর দুটি ফসফেট উপাদানগুলির অনুপাত পরিবর্তন করে বাফারের পিএইচ সঠিকভাবে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে, যা এটিকে বিভিন্ন পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তার সাথে খাপ খাইয়ে নিতে পারে।

নিম্নলিখিত প্রোটোকলটি 1M পটাসিয়াম ফসফেট বাফার 1 লিটার pH 6 এ প্রস্তুত করার বিবরণ দেয়।5:

প্রস্তুতি প্রোটোকলঃ

• প্রাথমিক প্রস্তুতিঃএকটি উপযুক্ত পাত্রে ৮০০ মিলিলিটার দ্রবীভূত পানি যোগ করুন।
• কেএইচ এর বিলুপ্তি₂পিও₄:পানিতে ৯৫ গ্রাম মোনোবেসিক পটাসিয়াম ফসফ্যাট যোগ করুন এবং সম্পূর্ণ দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত অবিচ্ছিন্নভাবে আলোড়ন করুন।
• কে এর বিলুপ্তি₂এইচপিও₄:৫২.৫ গ্রাম ডাইবেসিক পটাসিয়াম ফসফেট মিশ্রণটি মিশ্রণে যোগ করুন।
• পিএইচ সমন্বয়ঃএকটি ক্যালিব্রেটেড পিএইচ মিটার ব্যবহার করে, দ্রবণটি সাবধানে পিএইচ ৬.৫ এর জন্য হালকা হাইড্রোক্লোরিক এসিড বা পটাসিয়াম হাইড্রক্সাইড দ্রবণ দিয়ে সামঞ্জস্য করুন।যোগ করার মধ্যে পুঙ্খানুপুঙ্খ মিশ্রণ সঙ্গে ধীরে ধীরে সমন্বয় সম্পাদন.
• চূড়ান্ত ভলিউম সমন্বয়ঃদ্রবণটি এক লিটারের চূড়ান্ত ভলিউমে আনুন এবং বিশুদ্ধভাবে মিশ্রিত করুন।
• জীবাণুমুক্তকরণঃস্টেরিলাইজেশনের জন্য 0.22 μm ঝিল্লি ফিল্টারের মাধ্যমে সমাধানটি ফিল্টার করুন। হিমায়ন-ঘসানোর চক্রগুলিকে হ্রাস করার জন্য জীবাণুমুক্ত বাফারটি আলিকোট করুন।
• সঞ্চয়স্থান:ফিল্টার করা বাফারটি ঘরের তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন। দীর্ঘস্থায়ী সংরক্ষণের জন্য, 4°C এ রাখুন।

• রিএজেন্টের গুণমান:বিশ্লেষণযোগ্য গ্রেড বা উচ্চতর বিশুদ্ধতা রিএজেন্ট ব্যবহার করুন যাতে অশুদ্ধতা দ্বারা পরীক্ষার হস্তক্ষেপ রোধ করা যায়।
• পানির গুণমান:দূষিত পদার্থের প্রবেশ এড়াতে উচ্চমানের নিষ্কাশিত বা ডি-ইউনাইজড জল ব্যবহার করুন।
• পি এইচ মিটার ক্যালিব্রেশনঃব্যবহারের আগে সর্বদা স্ট্যান্ডার্ড বাফার দিয়ে পিএইচ মিটারটি ক্যালিব্রেট করুন।
• মিশ্রণঃপ্রস্তুতির সকল পর্যায়ে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রণ নিশ্চিত করুন।
• এসেপটিক টেকনিকঃপরিস্রাবণের সময় কঠোরভাবে জীবাণুমুক্ত থাকতে হবে।
• সংরক্ষণের শর্তাবলী:বুফারের অখণ্ডতা বজায় রাখার জন্য শীতল, অন্ধকার অবস্থানে সংরক্ষণ করুন।

গবেষকরা পরবর্তী দ্রবীভূতকরণের জন্য ঘনীভূত স্ট্যাক সলিউশন (5M বা 10M) প্রস্তুত করে পরীক্ষার দক্ষতা বাড়াতে পারেন।ফসফ্যাট উপাদান অনুপাত পরিবর্তন করে বাফারের পিএইচ পরিসীমা পরিবর্তন করা যেতে পারেধাতু সংবেদনশীল প্রক্রিয়া জড়িত পরীক্ষায়, একটি chelating এজেন্ট হিসাবে EDTA যোগ বিবেচনা।পিএইচ-সংবেদনশীল অ্যাপ্লিকেশনের জন্য তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ অপরিহার্য.

যদিও পটাসিয়াম ফসফেট বাফার অনেক অ্যাপ্লিকেশন কার্যকরভাবে পরিবেশন করে, বিকল্প বাফার সিস্টেম নির্দিষ্ট পরিস্থিতিতে পছন্দসই হতে পারে।ফসফেট হস্তক্ষেপ সমস্যাজনক হলে ট্রাইস বাফার মূল্যবান প্রমাণিত হয়, যখন এইচইপিইএস বাফার তার কম সেলুলার বিষাক্ততার কারণে কোষের সংস্কৃতি অ্যাপ্লিকেশনগুলির জন্য সুবিধা প্রদান করে।বাফার নির্বাচন পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা এবং সম্ভাব্য হস্তক্ষেপ বিবেচনা দ্বারা পরিচালিত করা উচিত.

১ এম পটাসিয়াম ফসফেট বাফার তৈরি করতে পারা একটি মৌলিক পরীক্ষাগার দক্ষতা।বুফারের বৈশিষ্ট্য এবং সীমাবদ্ধতা বোঝার সাথে মিলিত, গবেষকদের আত্মবিশ্বাস এবং নির্ভুলতার সাথে পরীক্ষা পরিচালনা করতে সক্ষম করে।